《排球少年剧场版：结束与开始》继续讲述烏野高中排球队在高中排球赛季中的成长与挑战。故事背景设定在上一季全国大赛结束后，烏野队员们面临各自人生新阶段的选择和挣扎，既有毕业的舍不得，也有新队伍组建的期待，影片通过青春与热血的交织展现了排球精神的传承与延续。
影片围绕主角日向翔阳与影山飞雄展开，描绘他们在全国大赛后不断磨练技艺，同时新队员的加入为团队注入新活力。期间，球队内外充满矛盾与考验，队员们必须克服心理障碍，增强团队协作。赛场竞技场面紧张刺激，体现了排球比赛的速度与力量。
关键转折点是新生代与毕业生在各自的挑战中达成共识，烏野队在新队长的带领下重新集结，准备迎接新的赛季。高潮部分集中在一场高水平的热身赛，队员们展现出超越自我的实力和团队精神。影片最终以烏野队肩并肩踏上新征程为结尾，象征着“结束”也是“开始”，传递出对未来满怀希望的情感。
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